制備純化所用填料的平均粒徑從5-100um,所用流速差異很大，每個(gè)工程師都有自己的經(jīng)驗值，基本是以分開(kāi)為主但各有說(shuō)辭。
高壓制備色譜以10um填料為主，已廣泛應用于胰島素、多肽、核酸、抗生素、造影劑、動(dòng)植物活性成份等難分離樣品。
70年代分析液相色譜開(kāi)始商品化。80、90年代開(kāi)始，5um填料開(kāi)始成為分析主流，直到現在還是各國藥典的常規標準。正好5um和10um填料的范德姆特方程能夠發(fā)現，要得到低的H值，10um顆粒的線(xiàn)速度的佳操作范圍非常窄。如果流動(dòng)相的速度過(guò)慢或過(guò)快，將會(huì )增加H，進(jìn)而降低色譜分離。而5um的顆粒在較高的流動(dòng)相速度下有較低的H值同時(shí)有較大的線(xiàn)速度范圍。
通過(guò)測算，發(fā)現對于5um填料的色譜柱，佳線(xiàn)速度對應的是大概是0.95mm/s，而所用色譜儀都是需要設定體積流速ml/min的。線(xiàn)速度一定，體積流速和色譜柱內徑是有關(guān)的。在色譜儀上輸入流速時(shí)，大家都覺(jué)得是1mL/min簡(jiǎn)單且不易出錯，正是1mL/min對應的是4.6mm內徑色譜柱的佳流速，而1.18mL/min對應的是5mm內徑色譜柱的佳流速（5um填料）。
同樣對于高壓制備色譜填料10um，內徑4.6mm色譜柱佳的線(xiàn)性流速是0.7ml/min。因此，當使用填料粒徑相同而柱管內徑不同的柱子時(shí)，可由已知的一個(gè)規格色譜柱的佳流速F通過(guò)簡(jiǎn)單的換算，即保持線(xiàn)速度不變，線(xiàn)性流速和色譜柱的直徑平方成正比，就可以得到另一個(gè)規格的色譜柱的佳流速，而在現實(shí)各藥廠(chǎng)中很多設備測試柱效依舊用50ml/min，主要原因是有些設備廠(chǎng)家在做安裝啟動(dòng)時(shí)怕浪費時(shí)間，如果是做樣品，那就增長(cháng)了一個(gè)周期，降低了產(chǎn)能。實(shí)際工作中，如果在保證分離良好的條件下可以通過(guò)繼續增加流速縮短工藝周期的方式減弱佳線(xiàn)性流速對理論塔板數影響，從而提高產(chǎn)能，降低單位產(chǎn)品的純化成本。
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