真蛋白測定廠(chǎng)家講述飼料中真蛋白的測定試驗
蛋白質(zhì)是衡量糧食和飼料營(yíng)養價(jià)值的重要指標之一。一般蛋白質(zhì)含量以粗蛋白質(zhì)表示,其中粗蛋白質(zhì)包括真蛋白質(zhì)和非蛋白質(zhì)氮。非蛋白質(zhì)氮有氨、尿素、碳銨、磷酸氫銨和尿素復合物等,它們可替代一部分蛋白質(zhì)飼料,但也存在有害物質(zhì)如三聚氰胺。當飼料中添加了這些物質(zhì)以后,以粗蛋白指標就不能反映其真實(shí)性,因此檢測其中的真蛋白質(zhì)、非蛋白氮就可以*反映飼料的蛋白質(zhì)營(yíng)養價(jià)值。
一、測定原理
飼料蛋白質(zhì)經(jīng)沸水提取并在堿性溶液中被硫酸銅沉淀。過(guò)濾和洗滌后,可將純蛋白質(zhì)和非蛋白質(zhì)含氮物分離,再用凱氏定氮法測定沉淀物中的蛋白質(zhì)含量。
二、儀器設備
1.燒杯:200ml;
2.定型濾紙;
3.其他設備與粗蛋白質(zhì)測定法相同。
三、試劑與配制
1.100g.L-1硫酸銅溶液;(蛋白飼料)分析純硫酸銅(5水硫酸銅)10g溶于100ml水中;
2.25g.L-1氫氧化鈉溶液:將2.5g分析純氫氧化鈉溶于100ml水中;
3.10g.L-1氯化鋇溶液:1g氯化鋇溶于100ml水中;
4.2mol.L鹽酸溶液;
5.其他試劑與粗蛋白質(zhì)測定法相同。
四、測定步驟
準確稱(chēng)取試樣1g左右(至0.0001g)置于200ml燒杯中,加50ml水中,加熱至沸。
加入20ml硫酸銅溶液,(蛋白飼料)20ml氫氧化鈉溶液,用玻璃棒充分攪拌,放置1h以上。用定性濾紙過(guò)濾,然后用60~80攝氏度熱水洗滌沉淀5或6次,用氯化鋇溶液5滴和鹽酸溶液1滴檢查濾紙,直至不生成白色硫酸鋇沉淀為止。將沉淀和濾紙放在65攝氏度烘箱干燥2h,然后全部轉移到凱氏燒瓶中,(蛋白飼料)按半微量凱氏定氮法進(jìn)行氮的測定。